科學新利器- Exosome Extraction Reagent 2018/06/06

Exosome(外泌體)是由細胞質膜內陷所形成直徑大小30-150 nm的單層膜小囊泡，廣泛存在於所有組織、細胞間隙以及體液中，Exosome幾乎所有的細胞都會分泌Exosome，Exosome像郵差一樣，藉由表面的蛋白受體不同，可以精確地傳遞到特定的器官細胞中，進行細胞間的調節溝通。

先看一個統計數據 : 

近年來，台大沈湯龍老師在自然Nature期刊中發表，癌細胞轉移的關鍵是由於一群前衛哨兵- Exosome所領導，使得Exosome研究迅速發展，引領了癌症生物學研究新方向，並提供了新的診斷與治療的新平台。台灣研究者對於Exosome的關注與研究也漸漸火熱起來，研究領域從癌症、免疫、幹細胞、神經、心血管、代謝開始延伸，成為研究的一片新藍海。

目前的研究中，獲取Exosome的方法各自不同，如下表所述 : 

由上表可以了解，使用試劑盒萃取Exosome是最為簡單、快速且產量高的方式。

ACExtract Exosome Isolation Reagent (from medium) 只需要將樣品medium通過較低速離心即可獲得大量Exosome。與傳統超高速離心相比，樣品中的Exosome所受到的壓力較小，可以保持完整的型態。同時萃取過程所需時間更短(1天半)、所需起始樣品體積更少、提取效率更高，所獲取的Exosome可以應用於下游的研究，包含qPCR、NGS、cell co-culture等。

我們也比較了ACE與目前市面上常見的Exosome萃取試劑組，利用萃取血清中的Exosome後，委託第三方進行Nanoparticle Tracking Analysis (NTA)分析粒子的大小分布資訊，以及分析Exosome內miRNA表現情況。

Figure 1 : 從NTA的結果顯示，三個品牌的主峰接落在30-150 nm之間，而ACE 與 Vendor L 所萃取的Exosome顆粒峰型更為集中。

Figure 2 : 針對 30-150 nm的顆粒進行統計，結果顯示使用ACE萃取Exosome的數量與Vendor L相當，且明先優於Vendor S。

Figure 3 : 萃取後的Exsome，再利用 ACExtract Total RNA Extraction Reagent 萃取RNA，取等量miRNA進行qPCR分析6個miRNA，結果顯示ACE與Vendor S的Ct值十分接近並取趨勢一致。