酵母表達系統

序列

項  目

實驗內容

工作日

1

篩選陽性克隆(PCR)

1. 質體線性化(Plasmid linearization)
2. 電轉 (Electroporation)
3. 抗生素篩選 (Antibiotic selection)
4. PCR 確認轉殖基因(PCR confirmation)
5. 提供測試報告

7-14

2

小量表達測試

1. 將確認質體轉殖到感受態酵母後，挑選10個colonies，進行表達檢測。
2. 以SDS-PAGE或WB確認表達。
3. 提供測試報告

20-28

3

放大表達純化

1. 選擇表達最優的colony，進行200 ml 的表達
2. 一步親和純化。
3. 提供純化蛋白、測試報告

7-14

4

提高蛋白純度

進行蛋白純化優化測試，提高純度到90%~95%。

20-28

5

去除融合標籤(Tag)

使用蛋白酶將重組蛋白融合的標籤序列(His-Tag, MBP protein..等)切除。

蛋白純化

20-28

6

去除內毒素

根據蛋白量計算收費

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