Cell culture | 優化細胞轉染方法
細胞轉染是將外源基因導入細胞內的一種技術，將DNA,RNA等導入真核細胞內的技術，於分子細胞生物學研究控制真核細胞重要工具，研究基因功能，基因表達以及蛋白質生產等，應用越來越廣泛。
每一個實驗室，會有不同的實驗步驟以及方法，成功的細胞轉染，取決於許多的因素，不論是轉染的方法、細胞株健康程度、細胞株培養代數、細胞培養的密度、轉染質體的品質及比率、轉染實驗時培養基使用等因素，都會影響實驗的結果已及細胞的存活率；然而，追求高效轉染細胞的同時，轉染方法造成細胞死亡也是需要考慮的重要環節，以下提供一些可能因素及著手優化轉染方法。
使用健康的細胞株
使用健康並且適合轉染的細胞株，能改善轉染效率，使用代數較低的細胞，於50~90%密度貼附情況下，具有最活躍的生長分化效率，較容易接收外來質體，代數高的細胞株，繼代的過程當中細胞株會有形態的改變、不同的生長速率、減少蛋白產生量以及容易受到刺激，使用初代細胞株更能夠模擬原始組織生長情形，但初代細胞株具有一定限度的生長以及壽命；轉染過程使用相同的細胞量，確認不同轉染試劑於相同條件下的效率，另外，使用Mycoplasma Detector監測並確認細胞是否有黴漿菌汙染，汙染的細胞會降低轉染效率，過度繼代細胞會影響基因表達以及細胞轉染。
細胞培養的條件
細胞培養的過程使用的培養基及培養基，會影響轉染的效率，每一株細胞需要參考細胞來源使用的材料來進行實驗，才能夠獲得最好的轉染效率；有些脂質體包覆轉染方式容易受到血清影響，降低與細胞膜之間的作用，降低轉染效率，轉染過程中，培養基含有抗生素也會影響轉染效率。
使用高品質的質體轉染
高效轉染的質體，應避免RNA以及其它化學物的汙染，質體準備濃度應落在0.2-1.0mg/mL，A260/A280 比率適合落在1.7-1.9之間。
優化轉染質體使用量
不同的轉染試劑，應使用不同量的質體，使用較多的質體並不會造成較高的轉染效率，反倒產生較高的細胞毒性，轉染初代(Primary)細胞，可降低質體濃度造成的細胞毒性；此外，優化轉染試劑以及質體使用不同比率(µL: µg)，須於不同細胞株優化最佳轉染效率，如果轉染質體具有報導基因，可經由螢光顯微鏡估算細胞轉染效率，或是使用流式細胞儀，精確偵測螢光比率分析。
細胞存活率
細胞轉染試劑及材料在進行實驗之前，於每種細胞須測試試劑對細胞產生的毒性，可以經由 CCK-8 Cell Counting Kit 或是MTT等assay作為依據，最終的目標能達成具有高的細胞存活率以及轉染效率，質體及細胞如果具有內毒素及其他汙染，會降低細胞轉染效率，製備高品質質體及監測細胞汙染，可以改善此狀況。
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