E. coli Expression System

大腸桿菌蛋白表達系統是最常用的表達系統，是使用最廣泛且最經濟實惠的蛋白表達系統。但是仍然存在著表達量低、蛋白活性低、易形成inclusion body和含有內毒素等問題。ACE Biolabs 可提供從基因序列優化到大規模發酵製備等一系列服務。

◆ 基因序列優化，提高蛋白相容性；
◆ 自主研發載體，高效表達高度可溶；
◆ 階段實驗選擇，提供客製化實驗流程；
◆ 多種感受態E. coli：BL21(DE3)、Rosetta(DE3)、毒性pLysS、促二硫鍵Origami等。

服務內容

序列	項目	實驗內容	工作日
1	表達鑒定與可溶性檢測	將質體轉殖到感受態E.coli後，挑選5個colonies，進行表達檢測。以SDS-PAGE確認表達。選擇表達最優的colony，進行37度與15度可溶性分析檢測，2個誘導劑(IPTG)濃度優化以及SDS-PAGE或WB檢測。	7-14
2	表達鑒定與可溶性檢測 + 1L放大表達純化交付蛋白樣品＞1mg(蛋白純度80～85%)，以及詳細的實驗報告。	將質體轉殖到感受態E.coli後，挑選5個colonies，進行表達檢測。以SDS-PAGE確認表達。選擇表達最優的colony，進行37度與15度可溶性分析檢測，2個誘導劑(IPTG)濃度優化以及SDS-PAGE或WB檢測。 1L菌液培養表達，進行一步親和純化(常用：Ni、MBP、GST)。	20-28
3	放大表達純化	根據上述步驟確認 1 L 菌液的表達純化量，追加表達純化，以每 L 為單位計算。	7-14
4	提高蛋白純度	進行蛋白純化優化測試，提高純度到90%~95%。	20-28
5	去除融合標籤(Tag)	使用蛋白酶將重組蛋白融合的標籤序列(His-Tag, MBP protein..等)切除。蛋白純化	20-28
６	去除內毒素	根據蛋白量計算收費	7-14

服務流程