General Information
Co NTA Beads 可以從原核和真核表達系統中一步純化 His 標籤蛋白。該產品是以 4%瓊脂糖凝膠為基質，配體以四配位鍵螯合鈷。Co NTA Beads 相比 Ni NTA Beads 對 His 標籤蛋白具有更高的選擇性。具體性能見表 1。
表 1. Co NTA Beads 的產品性能
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項目 |
性能 |
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基質 |
4%瓊脂糖凝膠 |
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螯合離子 |
Co2+ |
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載量（/mL 基質） |
>20mg 6╳His-tagged protein |
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微球粒徑（μm） |
45–165 |
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最大壓力 |
0.1 MPa, 1 bar |
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儲存緩衝液 |
含 20% 乙醇的 1XPBS |
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儲存溫度 |
4°C-30°C |
Co NTA Beads 可以耐受一定範圍的變性劑和其他的添加劑，如表 2。
表 2. Co NTA Beads 試劑耐受情況
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試劑種類 |
濃度 |
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還原劑 |
10 mM β-mercaptoethanol1 |
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變性劑 |
8 M urea 6 M Gua-HCl |
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去汙劑 |
＜1% Triton™ X-100 1% NP-40 1% CHAPS ,SDS, sarcosyl |
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其他類 |
≤500 mM imidazole at pH7.0 to 8.0 for elution 30% ethanol2 20% glycerol 500 mM KCl 1.0 M NaCl 20mM MES 50 mM Tris3 50 mM HEPES 50 mM MOPS |
Note: 1 Co NTA Beads 6FF 立即用平衡液平衡，否則介質會變色。不要將介質保存在含
有β-Mercaptoethanol 的緩衝液中。
2 過高濃度的咪唑有可能會降低蛋白回收率。
3 乙醇有可能造成蛋白沉澱，降低蛋白回收率和堵柱子。
4 Tris 與金屬離子微弱結合造成載量降低。
避免使用下列試劑：DTT (dithiothreitol), DTE (dithioerythritol) and TCEP (TRIS (2-carboxyethyl) phosphine).會降低介質的蛋白載量。
EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) 、 EGTA (ethylene Glycolbis ([β-amino-ethyl ether])會將鈷離子從介質上剝落。
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