Proteinase K | 蛋白酶K
對於新型冠狀病毒肺炎疫情，如何有效控制且快速精確的檢測，其中的關鍵在於能夠提取到指定的樣品，且需排除樣品中的雜質（無關蛋白、核酸酶），而我們排除雜質時最常用的酶便是蛋白酶K。
簡介
蛋白酶K (Proteinase K) 是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶，主要切割點為脂肪族和芳香族等厭水族胺基酸的羧基端肽鍵，因為該酶可以降解角蛋白（Keratin），於是被命名為蛋白酶K (Proteinase K)。根據其蛋白結晶及分子結構學研究顯示該酶屬於枯草桿菌蛋白家族（subtilisinfamily），活性位點具有特徵性催化三聯氨基酸Asp39-His69-Ser224，具有極高的酶活性和廣泛的底物特異性，可去除RNA酶和DNA酶的活性，一般生物樣品中通常用來降解蛋白質，可從林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber）中純化得到並以鈣離子作保護劑。
蛋白酶K (Proteinase K) 關鍵催化位點
產品應用
新冠病毒的檢測中，核酸擴增試驗時的處理、提取、擴增是非常高風險的，因此擴增前需要先對標本進行病毒滅活，一般使用新冠核酸試劑組中自帶的病毒採樣液進行病毒滅活，其中的蛋白酶K (Proteinase K)是病毒採樣液中一個非常重要的成分
病毒採樣液有兩個作用:
1) 直接裂解病毒釋放核酸，消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。
2) 滅活病毒，讓病毒的蛋白變性，使其失去活性而“死掉”，不再有傳染性，提高運輸和檢測階段的安全性。
蛋白酶K (Proteinase K) 可降解與核酸緊密結合的組蛋白，分離DNA與蛋白質，使DNA能夠更好被提取；另外，蛋白酶K (Proteinase K) 可降解RNA水解酶（RNase）活性，抑制RNase水解模板的RNA，在RNA的提取和檢測過程中起到不可或缺的作用，因此蛋白酶K (Proteinase K)在新冠檢測中的意義十分重要。
規格參數
CAS.No : 39450-01-6
來源：酵母
外觀：白色或淡黃色乾粉
分子量：29kD
純度： ≥95%
活性： ≥30U/mg
E.C No.：3.4.21.64
DNase：未檢出
RNase：未檢出
儲存: 乾粉狀態可在0~4℃條件下低溫保存。溶解後分裝為適當體積，於-20℃儲存。運輸可在室溫下進行。正確的儲存條件下，乾粉狀態的有效期限可達二年。液體狀態在-20℃有效期限為半年。打開包裝使用後，如果在2~8℃環境下放置超過一週時間，建議過濾除菌或增加穩定劑如0.5%疊氮化鈉，防止微生物污染。
儲存緩衝液： 50 mM Tris-HCl緩衝液,2mM CaCl2 (pH 8.0)。
濃度： 10-20mg/ml (Stock)；10-100 µg/mL (Working)
反應條件：反應緩衝液中37-56℃溫育一小時
應用: DNA / RNA實驗，用於DNA / RNA分離
相關產品
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Cat.No |
品名 |
簡述 |
活性 |
規格 |
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蛋白酶K (Proteinase K) |
Proteinase K is provided as a lyophilized powder. It is useful for the proteolytic inactivation of nucleases during the isolation of DNA and RNA. |
N/A |
10mg/100mg |
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重組蛋白酶K (Proteinase K, Recombinant) |
PCR grade recombinant Proteinase K is derived from yeast based on the optimized gene of Engyodontium album by site-directed mutation. It is purified by chromatography process, and with calcium and glycerin as protective agents. It is free of DNase and RNase and is useful for the proteolytic inactivation of nucleases during the isolation of DNA and RNA. |
≥30U/mg |
10mg/100mg/1g |
常見Q&A
1. Q : 乾粉的蛋白酶K (Proteinase K)如何溶解？
A：50%的甘油溶解
2. Q : 蛋白酶K (Proteinase K)溶解以後怎麼保存？能保存多久?
A：保存溫度2-8度，可以保存24個月
3. Q : 蛋白酶K (Proteinase K)溶解後保存需要特殊的保護劑嗎？
A：不需要特殊的保護劑
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