Cell culture | 細胞凍存
細胞凍存最常用的技術是液態氮冷凍保存法，為了保存不易獲得的細胞株，因應不同的細胞貼覆及細胞生長狀態，採用不同的冷凍法凍存細胞，以下提出幾個細胞凍存需注意的面向。
- 凍存劑的選擇: 常見使用DMSO以及甘油，某些特殊狀況下，例如凍存幹細胞等細胞株則需要用特殊的凍存保護劑，因為DMSO或胎牛血清的生長因子，可能會誘發細胞分化，因而改用其它無添加血清，或是特殊等級的抗凍劑配方。若是DMSO濃度過高，增加細胞毒性，可以降低濃度；使用血清比例增高凍存細胞，亦具有保護作用；易分化的細胞則需要降低DMSO濃度或是使用毒性較低的凍存液。
- 溫度造成細胞凍存影響: 常見的凍存設施及手法，於操作時可先將DMSO放置於四度冰箱預冷，凍存細胞步驟中，較不會產生瞬間放熱產生細胞損傷，凍存細胞加入凍存液體時，需緩慢加入細胞，於凍存階段，放置於品質佳的漸凍盒可避免過快的降溫，使冰晶造成細胞破裂及永久性的損傷，影響細胞復甦存活率，解凍細胞則需快速解凍，去除抗凍劑。
- 冷凍管的選擇: 常見使用的冷凍管分為玻璃及塑膠製作的冷凍小管，玻璃的缺點是每次使用需要滅菌，塑膠的冷凍小管因蓋子內旋性及外旋性分成兩種，內旋性放入液態氮中較容易滲漏液態氮進去，需要旋緊，塑膠的冷凍小管，應具塑膠墊片，防止滲漏液態氮進去細胞影響復甦存活率。
- 懸浮細胞凍存: 貼附細胞及懸浮細胞凍存，差異在於懸浮細胞需要額外將懸浮細胞離心下來計數，凍存過程中手法更需緩慢小心，懸浮細胞凍存可使用較高濃度的血清保護細胞，避免細胞冷凍過程中破損。
- 凍存液應用於細胞治療: 細胞治療產品開發，注重凍存液的效能，及凍存液成分是否可能對人體產生安全性的疑慮，DMSO於部分的動物實驗及臨床實驗中證實可能會造成導致副作用的發生，包含頭痛、噁心或腹瀉等症狀，另一個案例為間質幹細胞(MSC)於幹細胞開發治療應用中，MSC經過冷凍解凍過後，細胞代謝及表面標記有明顯減少，所以細胞凍存中，減少細胞損傷更為重要，目前有不含DMSO的細胞凍存液，但如果是應用在臨床上需要具一定的合規性及安全性，使法規單位審查，另外也需要提出實驗的數據來佐證細胞凍存液的安全性以及有效性綜合評估。
ACE Biolabs 實驗室DMSO凍存細胞前後測試
實驗結果相較其他三種其它DMSO，相同凍存細胞變因情況下，使用ACE Biolabs DMSO細胞復甦後，細胞株型態正常，存活率較其他DMSO凍存劑較佳。
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